微生态制剂枯草芽孢杆菌的制作方法

枯草芽孢杆菌作为微生物菌剂中最常用的菌种，市场的需求量很大，现在简单介绍一下枯草芽孢杆菌的生产工艺。

一、菌种

枯草芽孢杆菌的种类繁多，根据产生代谢产物不同可以分为：产淀粉酶枯草芽孢杆菌、产蛋白酶枯草芽孢杆菌等。目前市场生产枯草芽孢杆菌厂家都有自己的特定菌种，菌种之间各不相同，每株菌种都有自己的特性。有的有效活菌数可以做的很高;有的产生代谢产物能力比较强，功能型比较好;有的分解有机物能力比较好。所以，购买枯草芽孢杆菌时，并不是菌量高的就一定是好的。

原始菌种一般用甘油管保藏在超低温冰箱中，可以保藏2-3年。需要时，取出进行活化，一般用斜面培养基活化后，斜面放置到冰箱中保存。斜面培养基中的菌种进行一次扩大培养，转移到茄子瓶培养基中，再把茄子瓶培养基中的菌种制作成菌悬浊液，菌种制作完成。菌悬浊液应当立即接种到种子罐中。

二、三级深层液态发酵

种子罐使用前应当进行空转杀菌，通常121℃以上，1.5兆帕，30min。冷却后，配料，按比例将所需物料投入种子罐中，搅拌均匀。再次对种子罐和物料进行杀菌，同时对空气过滤器及各个接触阀门管道进行灭菌。

灭菌完成后，通入无菌空气，冷却降温，等待接种。接种，将菌悬浊液接入到种子罐中。通常使用火焰接种法，操作简单、省时，但接触空气，操作不当容易导致染菌。比较安全的一种方法，压差法接种。特制的接种瓶，依靠控制种子罐中的压力降菌悬浊液吸入种子罐中，避免了与空气的接触，操作比较复杂。

接种完成后，就是枯草芽孢杆菌的生长过程。根据每一株菌的特性，控制温度、转速、ph、溶氧以及是否补加物料，时刻观察菌的生长情况。

一般微生物生长都需要周期，枯草芽孢杆菌也是一样的。微生物培养过程（生长期）分为四个时期。

1、调整期，也叫适应期、迟滞期。微生物进入新的生长环境后，需要一段时间适应环境。此时期，微生物生长缓慢，OD值（菌密度值）基本不变。

2、对数生长期，也叫对数期。此阶段，微生物由于已经适应了生长环境，加之培养基内营养丰富，微生物排出的有害物质少，对微生物生长繁殖的影响小，微生物进入迅速生长和大量繁殖阶段。OD值基本呈对数增加。

3、平衡期，也叫稳定期。经过一段时间的高速生长繁殖后，培养基内部营养物质消耗越来越大，有害物质逐渐积累，微生物生长繁殖受限，菌体出现死亡，新繁殖的个体数量与死亡数量趋于平衡，OD值趋于稳定。

4、衰亡期。培养基营养物质消耗殆尽，有害物质大量积累，微生物已不能正常生长繁殖，菌体大量死亡。OD值出现明显下降。

通常，枯草芽孢杆菌的生产是为了得到较高数量的活菌，一般等产生较多的芽孢时进行转罐，转入二级罐中，继续培养。

二级罐发酵完成后，转入发酵罐，在发酵罐中生长至90%以上芽孢时，放罐。

三、干燥

放罐后的发酵液有两种处理工艺

1、絮凝沉淀、板框压滤、烘干干燥

通过添加絮凝剂使发酵液中附着芽孢菌的固体颗粒絮凝沉淀，转移至板框中通过压力去除一部分水分，然后将剩余压成的固体粉碎后经过烘干制成粉末。这种工艺，由于添加了絮凝剂，增加了重量，但同时限制了粉末中活菌的菌含量。这种工艺获得的菌活性较大，菌的代谢产物损失较少。

2、喷雾干燥

首先，将发酵液通过碟片式离心机，去除大部分水分，剩余固体物质和水分通过压力泵进入喷雾干燥塔，进行喷雾干燥得到粉末。喷雾干燥技术效率较高，能得到较高菌含量的粉末，但是消耗电和蒸汽比较严重，而且处理温度较高会损失一部分活菌，菌的活性也会受到一定的影响。

干燥制得的粉末就是枯草芽孢杆菌原粉，通常原粉含菌量能够达到1000-2000亿/g甚至更高的含菌量，然后复配成各种菌含量的产品流通到市场中。

    山东益泰生物科技有限公司，以山东大学、山东农业大学、山东省农业科学院、中国微生物研究中心等科研院校和研究机构为依托，经公司研发和技术人员的不断努力，研制出多种适合不同领域的功能性菌株。经营范围：微生物菌剂的研发、加工、销售；饲料添加剂、生物有机肥销售；微生物技术信息咨询服务；污水、污泥治理；环保工程设计、施工；生物技术研发；预包装食品销售。